大型大量质粒提取试剂盒
产品概述
本试剂盒采用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,1 h内可完成单个样品的抽提工作。本试剂盒采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质,获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染或动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。
本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是10 kb甚至100 kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,即可有效纯化。可选任意体积溶解质粒,浓度可达5 μg/μL。超螺旋比例可高达95%,转染效果好。
推荐使用量及产量:高拷贝质粒推荐使用量150-200 mL,得率可多达0.5-2 mg左右;低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒,应适当加大菌体量,同时按比例增加P1、P2、PIII的用量,其它步骤相同。
注意事项
请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项
◇ 初次使用时,将试剂盒所带的全部RNase A加入溶液P1后(终浓度100 μg/mL)置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会有微量RNA残留,在溶液P1中补加RNase A即可。
◇ 环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热帮助溶解,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。
◇ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。
◇ 提取大质粒时操作动作要轻柔,应该使用剪大了开口的吸头,防止机械剪切对DNA的损坏。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。