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2×GS Taq PCR Mix XY9A0601

基础型Taq DNA聚合酶,适用性广,产量高,极速延伸(10~15 s/kb)

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2×GS Taq PCR Mix

产品组成

组分规格
2×GS Taq PCR Mix5×1.0 mL

保存条件

-20℃保存 24 个月。

产品简介

本产品包含高纯度 GS Taq DNA 聚合酶、dNTPs 以及优化的缓冲体系,浓度为 2×, 只需要添加引 物、模板和 ddH2O 即可进行 PCR 扩增,可有效扩增 3 kb 以内的 DNA 片段。体系中包含有蓝色电 泳指示剂,可在扩增完成后直接上样进行电泳检测,其迁移速度在 1% TAE 琼脂糖凝胶中与 500 bp 双链 DNA 片段相近。 

使用本产品扩增的 PCR 产物 3’端带有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于 TA 克隆。

产品特点

操作简单:2×Mix,只需要添加引物、模板和 ddH2O 即可进行 PCR 扩增;

极快的延伸速度:10~15 s/kb。

适用范围

适用于常规 PCR 扩增。

注意事项

1. 请使用高质量的模板进行扩增;

2. PCR Mix 应避免反复冻融,短期内多次使用可置于 4℃保存;

3. 本产品不可用于细菌 16S 鉴定。

使用方法

操作示例

按下表配制 PCR 反应体系(冰上操作)

组分25 μL 体系50 μL 体系终浓度

2×GS Taq PCR Mix

12.5 μL 25 μL
Primer 1 (10 μM)1.0 μL2.0 μL0.4 μM
Primer 2 (10 μM)1.0 μL2.0 μL0.4 μM
Template DNA*As requireAs require
ddH2OUp to 25 μLUp to 50 μL

*模板推荐量:

基因组 DNA:10~1000 ng;

质粒 DNA:1~30 ng。

cDNA:1~2 μL(不超过 PCR 反应总体积的 1/10)。

(以上为推荐的模板使用量,实际反应条件因模板、引物等的结构不同会存在一些差异,可根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系。)

建议的 PCR 条件

步骤温度时间循环数
预变性95℃3 min1
变性94℃25 s30~35 cycles
退火55~64℃25 s
延伸72℃10~15 s/kb
终延伸72℃1~5 min1
-4℃Hold-

常见问题与解决办法

Q1:扩增无产物或产物量少?

A1:

1) 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量,使用高质量模板;

2) 模板浓度过低。适当增加模板用量;

3) 引物不合适。优化引物设计;

4) 退火温度不合适。设置退火温度梯度,摸索合适的退火温度;

5) 循环数过少。适当增加 5~10 个循环;

6) 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至 20~30 s/kb。

Q2:扩增出现非特异条带或弥散带?

A2:

1) 引物特异性差。优化引物,避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增;

2) 引物浓度过高。降低引物浓度;

3) 模板过量或纯度差。减少模板量,使用高质量模板;

4) 退火温度过低。适当提高退火温度或使用 Touchdown PCR 程序;

5) 循环数过多。减少循环数至 25~30 cycles。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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